Porcine Acute Diarrhea Syndrome Coronavirus (SADS-CoV) adalah coronavirus patogen enterik babi yang baru ditemukan yang dapat menyebabkan diare berair pada anak babi yang baru lahir dan menyebabkan kerugian ekonomi yang signifikan bagi industri babi.Saat ini, tidak ada metode serologis yang cocok untuk mengevaluasi efektivitas infeksi dan vaksin SADS-CoV, sehingga ada kebutuhan mendesak untuk menggunakan enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) yang efektif untuk menutupi kekurangan ini.Di sini, plasmid rekombinan yang mengekspresikan protein spike (S) SADS-CoV yang menyatu dengan domain IgG Fc manusia dibangun untuk menghasilkan baculovirus rekombinan dan diekspresikan dalam sel HEK 293F.Protein S-Fc dimurnikan dengan resin protein G dan mempertahankan reaktivitasnya dengan antibodi anti-manusia Fc dan anti-SADS-CoV.Kemudian protein S-Fc digunakan untuk mengembangkan ELISA tidak langsung (S-iELISA) dan mengoptimalkan kondisi reaksi S-iELISA.Akibatnya, dengan menganalisis nilai OD450nm dari 40 serum negatif SADS-CoV yang dikonfirmasi oleh immunofluorescence assay (IFA) dan Western blotting, nilai batas ditentukan menjadi 0,3711.Koefisien variasi (CV) dari 6 serum SADS-CoV positif di dalam dan di antara rangkaian S-iELISA semuanya kurang dari 10%.Uji reaktivitas silang menunjukkan bahwa S-iELISA tidak memiliki reaktivitas silang dengan serum virus babi lainnya.Selain itu, berdasarkan deteksi 111 sampel serum klinis, tingkat kebetulan keseluruhan IFA dan S-iELISA adalah 97,3%.Uji netralisasi virus dengan 7 nilai OD450nm serum yang berbeda menunjukkan bahwa nilai OD450nm yang dideteksi oleh S-iELISA berkorelasi positif dengan uji netralisasi virus.Terakhir, S-iELISA dilakukan pada 300 sampel serum peternakan babi.Kit komersial enterovirus babi lainnya menunjukkan bahwa tingkat positif IgG dari SADS-CoV, TGEV, PDCoV dan PEDV masing-masing adalah 81,7%, 54%, dan 65,3%., 6%, masing-masing.Hasil penelitian menunjukkan bahwa S-iELISA bersifat spesifik, sensitif, dan dapat direproduksi, serta dapat digunakan untuk mendeteksi infeksi SADS-CoV pada industri babi.Artikel ini dilindungi oleh hak cipta.seluruh hak cipta.
Waktu posting: Jun-22-2021